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Biomedal公司 pUT mini-Tn5 vectors
乐博生物 / 2012-11-13
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pUT mini-Tn5 vectors

仅用于科研使用

产品简介

通过位于质粒cis上的tnp*基因编码的tansposase(转座酶)的作用,mini-Tn5可被从运载体质粒上转置到染色体上。pUT mini-Tn5载体,可通过在mini-Tn5区域内进行克隆,从而在细菌染色体内插入任何一段DNA片段。在插入片段后,tnp*基因会缺失。因此,mini-

transposon就会稳定的整合到染色体中,并获得稳定遗传。不同的pUT mini-Tn5载体可以用于重复插入片段。因此,要在同一菌体内可实现多次插入,也就只有一个限制因素了,那就是——不同的选择标志物。

应用

pUT mini-Tn5载体的一些最普遍的应用:

-克隆

-插入突变

-启动子探测

-条件性表型和非极性突变的建立

-转录终止分析

-环境应用:用标记基因标识,监控释放到环境中的微生物和基因转录调控

优点

-通过简单的遗传操作,在目标菌株的染色体中,稳定地插入异源DNA

-通过运载质粒的条件复制,实现转座因子选择性地整合到染色体上

-可插入片段大小的范围广

-可实现在同一菌株细胞内多次插入

-对克隆载体实现轻松修饰

-利用罕见的Hot ISfi I酶切位点

-广泛应用于革兰氏阴性受体菌

参考文献

1. De Lorenzo V., Timmis K.N. 1994. Methods in Enzymology, 235, p. 386-405.

2. De Lorenzo V., Herrero M., Sanchez J., Timmis K.N. 1998 Microbiology Ecology, 27, p. 211-224.

3. Herrero M., De Lorenzo v., Tmimis K.N. 1990. Journal of Bacteriology, 172, p. 6557-6567.

 

pUT mini-Tn5产品

仅用于科研

pUT mini-Tn5 protocol

相关产品

pUT mini-Tn5载体体系

Product 

Format

Cat.NO

pUT mini-Tn5 Cm

8ug

CV-3223

pUT mini-Tn5 Km

8ug

CV-3224

pUT mini-Tn5 Sm/Sp

8ug

CV-3225

pUT mini-Tn5 Tc

8ug

CV-3226

pUT mini-Tn5 Tel

8ug

CV-3227

NPDP pUT mini-Tn5 Cm

2ug

CV-3421

NPDP pUT mini-Tn5 Km

2ug

CV-3422

NPDP pUT mini-Tn5 Sm/Sp

2ug

CV-3423

NPDP pUT mini-Tn5 Tc

2ug

CV-3424

Kits

Product

Format

Cat. No

PANC-1 mini-Tn5 package (*)

1Kit

KT-3260

PANC-1 plus mini-Tn5 package(**)

1Kit

KT-3261

pUT mini-Tn5 Cm Kit

1Kit

KT-3228

pUT mini-Tn5 Km Kit

1Kit

KT-3229

pUT mini-Tn5 Sm/Sp Kit

1Kit

KT-3230

pUT mini-Tn5 Tc Kit

1Kit

KT-3231

(*) PANC-1 mini-Tn5 package包含pUT mini-Tn5 Cm, pUT mini-Tn5 Km, pUT mini-Tn5 Sm/Sp  pUT mini-Tn5 Tc及载体全序列CD盘。 (**) PANC-1 plus mini-Tn5 package包含pUC16 Not, pUC18Sfi, TSS solution, E. coli DH5α λpirE. coli S17-1 λpirE. Coli DH (pRK2013)  E. coli DH5α (pRK2073)及载体全序列CD盘。

辅助载体

Product

Format

Cat. No

Chloramphenicol

5g

RS-3218

Kanamycin (monosulfato)

5g

RS-3219

Tetracycline (hidrocloruro)

5g

RS-3220

Streptomycin (sulfato)

5g

RS-3221

Potassium tellurite

1g

RS-3222

TSS

1.5mL

RS-3215

TSS

1.5mL×5

RS-3216

菌株

Pruduct

Format

Cat. No

E. coli DH5α λpir

Stab

BS-3233

E. coli S17-1 λpir

Stab

BS-3234

E. coli CC118 λpir

Stab

BS-3235

E. coli DH5α(pRK2013)

Stab

BS-3236

E. coli DH5α(pRK2073)

Stab

BS-3263

E. coli SM10 λpir

Stab

BS-3303

引物

Product

Format

Cat. No

Primer(pUToriR6k)

2nmol

PR-3280

pUTmini-Tn5 Cm载体

pUTmini-Tn5 Cm载体,是一个具有8686碱基对的质粒,属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Cm。因携带有cat 基因,所以,pUTmini-Tn5 Cm具有氯霉素抗性。表达框CmR是由Ω interposon (1)衍生而来,两端是Tn5IO末端(末端重复序列),在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内,包含了由156-nt反向重复序列组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)

    Selection for resistance to

    Chloramphenicol

    Replication Origin

    R6K

    Transfer Origin

    RP4criT

    Antibiotic Resistance

    Ampicillin, Chloramphenicol

    Host strain

    E. coli λpir strains

    Copy number

    Low

pUT mini-Tn5 Km载体

pUT mini-Tn5 Km载体是一个具有7575碱基对的质粒,属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Km。因携带卡那霉素抗性基因(KmR)而具有卡那霉素抗性。其两端是Tn5IO末端(末端重复序列)。Mini-Tn5 Km在卡那霉素基因(源于Tn5)左极端处多了一个I末端。表达框具有卡那霉素抗性基因,在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内,连接有156-nt组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)

    Selection for resistance to

    Kanamycin

    Replication Origin

    R6K

    Transfer Origin

    RP4oriT

    Antibiotic Resistance

    Ampicillin, Kanamycin

    Host strain

    E. coli λpir strains

    Copy number

    Low

pUTmini-Tn5 Sm/Sp载体

pUTmini-Tn5 Sm/Sp载体具有7386碱基对的质粒,属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Sm/Spmini-Tn5 Sm/Sp携带有性标识——add基因,链霉素和壮观霉素抗性基因。表达框Sm/SpRinterposon衍生而来,两侧有Tn5IO末端(末端重复序列),在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内,连接有156-nt组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)

    Selection for resistance to

    Streptomycin-Spectinomycin

    Replication Origin

    R6K

    Transfer Origin

    RP4oriT

    Antibiotic Resistance

    Ampicillin, Streptomycin, Spectinomycin

    Host strain

    E. coli λpir strains

    Copy number

    Low

pUTmini-Tn5 Tc载体

pUTmini-Tn5 Tc载体是一个具有7477碱基对的质粒,属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Tcmini-Tn5 Tc携带有抗性标识——tet基因,四环素抗性基因。表达框TcRΩ interposon (1)衍生而来,两端连接有Tn5IO末端(末端重复序列)。在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内,连接有156-nt组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)

    Selection for resistance to

    Tetracycline

    Replication Origin

    R6K

    Transfer Origin

    RP4oriT

    Antibiotic Resistance

    Ampicillin, Tetracicline

    Host strain

    E. coli λpir strains

    Copy number

    Low

pUTmini-Tn5 Tel载体

pUTmini-Tn5 Tel载体是一个具有8387碱基对的质粒,属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Telmini-Tn5 Tel,携带有选择性标识——亚碲酸钾(K2TeO3,有毒化合物)抗性的cassette。该抗性基因(TelR)Klebsiella aerogenes (1)的质粒RK2中的Tel AB和 kilA基因编码。TelR位于mini-Tn5迷你转座子的IO末端(末端序列)之间。

    Selection for resistance to

    Potassium tellurite

    Replication Origin

    R6K

    Transfer Origin

    RP4oriT

    Antibiotic Resistance

    Ampicillin

    Host strain

    E. coli λpir strains

    Copy number

    Low

PANC-1 Mini Tn-5 Package

Kit components (Cat. No. KT-3260)

Product

Quantity

Storage

Cat. No

pUT mini-Tn5 Cm

8ug

4 or -20

CV-3223

pUT mini-Tn5 Km

8ug

4 or -20

CV-3224

pUT mini-Tn5 Sm/Sp

8ug

4 or -20

CV-3225

pUT mini-Tn5 Tc

8ug

4 or -20

CV-3226

Sequences CD

1ug

——

 

 


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